对甲基苯胺理化性质(四甲基联苯胺溶解性)

四甲基联苯胺理化性质?

四甲基联苯胺是一种化学物质,化学式是C16H20N2。

中文名

四甲基联苯胺

英文名

Tetramethylbenzidine

别称

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺

化学式

C16H20N2

物理性质

熔点 : 168-171 °C(lit.)

沸点 : 168-171 °C

密度 : 1

储存条件 : 2-8°C

化学性质

3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)即TMB是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深蓝色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。

挥发性有机物,游离酸是什么溶液?

游离酸是四甲基联苯胺,熔点168-171°C,主要用于作为过氧化氢酶底物用在ELISA反应中,该底物能产生可溶性淡蓝色的末端产物,能在370或620-650nm用分光光度计读取。TMB反应可以用2MH2SO4(产生黄色)终止,并能在450nm读取。因此TMB是测定血液、检测血红素(hemoglobin)和过氧化物酶的灵敏和特定试剂。

TMB是什么意思?

TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,

  且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。

  TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。

  由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。

  TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试

  剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等

  优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈

  黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。

  ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用

mpo染色的原理及意义?

过氧化物酶(peroxidase,POX)是存在于生物体内的一种酶,在血细胞中主要为髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO),主要存在于粒细胞和单核细胞中。其染色原理是利用粒细胞、单核细胞内的POX,能使过氧化氢(H2O2)分解,释放出新生态氧,氧化四甲基联苯胺,生成四甲基联苯胺蓝,再与亚硝基铁氰化钠结合,形成稳定的蓝色颗粒,沉淀于细胞质内。

【试剂】

1.0.1%四甲基联苯胺(TMB)乙醇溶液 0.1g TMB溶于100ml 88%乙醇中,储于棕色瓶中,4℃保存。

2.亚硝基铁氰化钠饱和溶液(360g/L) 少量蒸馏水中加入亚硝基铁氰化钠晶体,搅拌直至不再溶解为止,储于棕色瓶中,4℃保存。

3.1% H2O2溶液(新鲜配制) 30% H2O2 1ml加至蒸馏水至29ml。

4.稀H2O2溶液 1% H2O2 1滴加蒸馏水10ml,临用前配制。

5.瑞氏染液。

【操作】

1.取0.1% TMB乙醇溶液1ml,加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10μl,在临用前配制。

2.新鲜干燥血片或骨髓片,加0.1% TMB-亚硝基铁氰化钠饱和溶液的混合试剂0.5ml,使布满整张涂片,放置1min。

3.加稀H2O2溶液0.7ml,用洗耳球吹匀,染色5~10min,水洗,待干。

4.用瑞氏染液复染15~30min,水洗,待干,用油镜镜检。

【注意事项】

1.血片或骨髓片应新鲜,立即固定,才能保持酶的活性。

2.TMB配制在85%~88%乙醇溶液中染色效果较好,勿用95%乙醇,否则使显色反应减弱或消失。

3.H2O2溶液需新鲜配制,其浓度过高可抑制酶的活性。粒细胞中若看不见阳性颗粒,表示H2O2浓度太高。H2O2加于血片上若不产生气泡,则表示失效。

4.在涂片上两液混匀时,动作宜轻,以免将阳性颗粒吹散到阴性细胞上。

5.POX的染色方法有复方联苯胺法、二氨基联苯胺法和四甲基联苯胺法等,四甲基联苯胺法是临床上常用的POX染色方法。

【结果】

1.结果判断 在胞质中出现蓝色或蓝黑色颗粒为阳性反应(复染者呈蓝黑色)。阳性程度判断标准如下。(www.guayunfan.com)

阴性(-):胞质中无蓝色或蓝黑色颗粒。

弱阳性(+):胞质中的蓝色或蓝黑色颗粒,量少且细小。

阳性(++):胞质中的蓝色或蓝黑色颗粒量多,但粗细不一。

强阳性(++

四甲基联苯胺的氧化原理?

粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶(POX),POX能分解H2O2而释放出新生氧,使四甲基联苯胺氧化成联苯胺蓝,后者与亚硝基铁氰化钠结合,再进一步氧化形成稳定的蓝色物质,沉淀于酶活性的细胞质内。

四甲基联苯胺溶液国标?

TMB溶液;TMB游离酸;四甲基联苯二胺;TMB游离酸溶液;钡硫氰酸盐三水合物;四甲基联苯胺,TMB;A B双液 TMB显色液;四甲基联苯胺盐酸盐 二水;3,3′,5,5′-四甲基联苯胺;3,3,5,5-四甲基联苯胺溶液

隐血试验名词解释?

指在消化道出血量很少时肉眼不能见到粪便中带血并且粪便中有少量红细胞被破坏。

全新方法–四甲基联苯胺法(家用型便隐血检测试纸)

原理:试纸上包被一层四甲基联苯胺显色染料和过氧化物膜,在马桶或便池内,粪便中的血红蛋白、血红素可扩散到周围的水中,血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性,能通过过氧化物膜释放出氧,将无色的四甲基联苯胺氧化成有色的联苯胺兰,呈蓝绿色显出。

游离胺的来历是什么?

游离胺是氨分子与氢氧化铵形式存在。

性状

白色结晶

气味

无嗅,无味

稳定性

光不敏感,贮存稳定

【学名】

四甲基联苯胺

【性能参数】

白色结晶,无嗅,无味,光不敏感,贮存稳定。易溶于丙酮、乙醚、二甲亚砜、二甲基甲酰胺等有机溶剂。

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